Isi
Pewarnaan Gram, atau Gram, adalah teknik cepat dan sederhana yang bertujuan untuk membedakan bakteri sesuai dengan karakteristik dinding selnya setelah terpapar pewarna dan larutan yang berbeda.
Jadi, dengan pewarnaan Gram, dimungkinkan untuk memeriksa, selain bentuk bakteri, warna yang mereka peroleh, dan hasil ini penting untuk menentukan strategi lain untuk mengidentifikasi spesies bakteri dan bagi dokter untuk menunjukkan perawatan pencegahan sesuai dengan karakteristik yang diamati secara mikroskopis.
Pewarnaan Gram biasanya dilakukan secara rutin di laboratorium dan merupakan bagian dari pemeriksaan bakterioskopi. Pahami apa itu bakterioskopi dan cara melakukannya.
Bagaimana pewarnaan Gram dilakukan
Pewarnaan Gram adalah metode yang cepat, praktis dan murah untuk mengidentifikasi bakteri yang bertanggung jawab atas infeksi, berguna bagi dokter untuk menunjukkan pengobatan pencegahan untuk infeksi yang mungkin terjadi, karena karakteristik khusus dari kelompok bakteri ini diketahui,
Pewarnaan Gram dilakukan dalam 7 langkah utama, namun protokolnya dapat bervariasi tergantung pada laboratorium:
- Tempatkan beberapa koloni bakteri pada slide, tambahkan setetes air untuk memfasilitasi homogenisasi koloni;
- Biarkan mengering sedikit, dan bilahnya dapat melewati api dengan cepat untuk memudahkan pengeringan, namun penting untuk memperhatikan suhunya, karena jika suhu terlalu tinggi dapat terjadi perubahan struktur bakteri, yang dapat mengganggu hasil. ujian;
- Setelah kaca objek mengering, tutupi dengan pewarna kristal violet dan biarkan bekerja selama sekitar 1 menit;
- Cuci slide dengan aliran air mengalir dan tutup slide dengan lugol, yang bertujuan untuk mengencangkan pewarna biru, dan diamkan selama 1 menit. Kedua jenis bakteri tersebut dapat menyerap kompleks yang dibentuk oleh pewarna dan lugol, membiru;
- Kemudian, cuci slide dengan air mengalir dan oleskan alkohol 95%, biarkan bekerja selama 30 detik. Alkohol bertanggung jawab untuk melarutkan membran lipid yang membentuk bakteri gram negatif dan, dengan demikian, menghilangkan kompleks yang terbentuk antara pewarna dan lugol, mengubah warna bakteri ini. Namun, dalam kasus bakteri gram positif, alkohol mendehidrasi dinding sel bakteri gram positif, menyebabkan pori-pori berkontraksi dan membuatnya tidak dapat ditembus;
- Kemudian, cuci dengan air mengalir lagi dan tutup kaca objek dengan pewarna kedua, fuchsin atau safranin dan biarkan bekerja selama 30 detik;
- Kemudian, cuci slide dengan air mengalir dan biarkan mengering pada suhu kamar.
Segera setelah slide mengering, dimungkinkan untuk meletakkan setetes minyak imersi dan mengamati slide di bawah mikroskop dengan tujuan 100x, memungkinkan untuk memeriksa ada atau tidaknya bakteri, serta keberadaan ragi dan sel epitel.
Untuk apa ini
Pewarnaan Gram memiliki tujuan utama untuk membedakan bakteri sesuai dengan karakteristik dinding sel dan morfologi umum. Jadi, menurut karakteristik yang diamati di bawah mikroskop, bakteri dapat diklasifikasikan menjadi:
- Bakteri gram positif, yang divisualisasikan dengan warna biru karena tidak berubah warna oleh alkohol, karena mereka memiliki dinding sel yang lebih tebal dan pori-porinya menyempit saat terkena lugol;
- Bakteri gram negatif, yang divisualisasikan dengan warna merah muda / ungu karena berubah warna oleh alkohol dan diwarnai oleh safranin atau fuchsin.
Setelah melihat bakteri di bawah mikroskop, dimungkinkan untuk dilakukan pemeriksaan lebih lanjut di laboratorium untuk mengidentifikasi spesies bakteri tersebut. Namun, melalui Gram dan asosiasi dengan tanda dan gejala yang ditunjukkan oleh orang tersebut, dokter dapat menunjukkan perawatan pencegahan sampai hasil pemeriksaan yang lebih spesifik tersedia, karena cara ini memungkinkan untuk menurunkan laju replikasi bakteri dan mencegah komplikasi.